這個時期的世界圍繞著歐洲而旋轉，在歐洲國家的刺客經常為了反抗舊有體制而行俠仗義、完善社會會福利制度，甚至發動革命；而非歐洲國家的刺客則充滿著強烈的愛國主義，開始對抗西方殖民者。
美洲史（1701～1789年）
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為美洲史三部曲為主，以《刺客教條4：黑旗》為開端，這代以加勒比海域為地圖，海戰為主線。《刺客教條：叛變》則沿用了前代的海戰系統，主角可以從聖殿騎士的觀點來遊玩。《刺客教條3》、《刺客教條3 重製版》的故事背景，開創了“海戰”和“跨島登陸”的遊玩模式，讓遊戲的體驗性和自由度前所未有的提升，這也是為什麼此作品可以超越一代、二代，率先推出重製版的原因。本傳外傳《刺客教條3：自由使命》系列第一次可以使用女性作為遊玩主角。
刺客兄弟會
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拉頓哈給頓 / 康納（Ratonhnhaké:ton / Connor）
拉頓哈給頓（英語：Ratonhnhaké:ton）（1756年－卒年不詳），又稱康納（英語：Connor），一半英國、一半美國原住民莫霍克族的混血兒刺客，《刺客信条III》的主角之一。刺客愛德華·肯威的孫子、聖殿騎士海爾森·肯威與莫霍克族女性卡尼耶蒂依翁的兒子[1]，戴斯蒙、威廉·「比爾」·邁爾斯的祖先之一。
為了守護自己的家園與人民，並向燒毀村落、殺害母親的兇手復仇。拉頓哈給頓在朱諾的指示和族母的建議下找到了殖民地僅存的刺客大師阿基里斯·達文波特，從他那學習刺客技巧，阿基里斯為了讓他融入殖民地居民的生活，於是替他取了「康納」——阿基里斯已逝的兒子的名字。
康納在學成後開始踏上獵殺聖殿騎士成員的旅程，並在遇見喬治·華盛頓後認為他可以改變殖民地的未來而選擇與其聯手，但這也使他開始與領導殖民地地區的聖殿騎士大師、自己的父親海爾森產生了對立。康納一度與父親聯手，試圖爭取美國的獨立，但最後仍因雙方對美國未來的領袖之間選擇不同而分道揚鑣，康納最後在紐約喬治堡刺殺查爾斯·李與爭奪大神殿鑰匙時與海爾森戰鬥將對方殺死。在殺死查爾斯·李並奪回大神殿鑰匙後，康納回到自己的故鄉，並在此與朱諾交流、重建了美洲的刺客組織。
在現代被Abstergo命名為「康納·肯威（Connor Kenway）」。
愛德華·詹姆士·肯威（Edward James Kenway）
1693年－1735年，威爾士人《刺客教條IV：黑旗》的主角。
前海盜，刺客大師、英國刺客兄弟會的領導人之一，但認為自己不合資格而拒絕接受「導師（Mentor）」的稱號。
聖殿騎士海爾森·肯威的父親[2]、刺客拉頓哈給頓（康納）的祖父。戴斯蒙、威廉·「比爾」·邁爾斯和柳生聖人的祖先之一。
年輕的愛德華不甘心當個農夫度過自己的一生，於是和妻子約定好後搭上私掠船成為了一名海盜。
1715年，愛德華殺死了一名準備投誠聖殿騎士團之刺客（鄧肯·沃爾波），其身上信件指示前往哈瓦那與總督勞雷亞諾·托勒斯（Laureano de Torres）及其秘密組織（聖殿騎士團）會面，愛德華為信上所言的報酬心動而冒充該刺客前往與眾人會面，得悉聖殿騎士欲聯同英國、西班牙和法國以打擊加勒比海海盜之名尋找一名能協助它們掌握「觀測台」位置之聖者巴沙洛繆·羅伯茨（Bartholomew Roberts）。愛德華不但使當地刺客組織陷入劣勢，其後亦因身分敗露而被帶走囚於船上。愛德華逃離監禁後釋放多名海盜及奪得一艘西班牙雙桅橫帆船，隨後將之命名為「寒鴉號」（Jackdaw）。1718年愛德華與一群海盜同伴（包括「黑鬍子」愛德華·蒂奇（Edward Thatch）、瑪莉·瑞德（Mary Read）等人）為了能活在一個不受英國控制的自由地區而聚集於拿骚，但缺乏管理和經濟活動、疫病出現再加上其後英軍進駐拿騷向海盜進行勸降使各人之間出現分歧，愛德華雖然成功偷取疫苗但未能阻止英軍於通牒限期前發動圍剿，黑鬍子在與愛德華搶奪一艘海軍主力艦時被殺，愛德華乘亂返回寒鴉號逃離拿索水域並以大伊納瓜島作為基地。由於認為奪得「觀測台」可以獲得數之不盡的財富，愛德華致力追查羅伯茨的下落，亦發現瑪莉乃一名刺客並被邀前往圖盧姆與刺客組織會面。由於愛德華以往對聖殿騎士的協助，組織不久受英軍（聖殿騎士）襲擊，愛德華受瑪莉所託為組織完成刺殺合約以換取報酬，其後也逐一刺殺叛變至聖殿騎士的海盜和曾會面的騎士成員。愛德華其後終尋獲羅伯茨並在非洲普林西比島進入封存「觀測台」之第一文明密室：只要有監視目標的血液樣本，「觀測台」就能把其目視之一切以立體影像呈現。羅伯茨此時背叛愛德華並乘他傷重時把他交予英軍以獲取懸賞。1720年4月，愛德華與各海盜（包括瑪莉）被審判下獄等待處決，二人在刺客組織協助下逃獄但瑪莉因病重而在途中不支去世。其死亡使愛德華決心加入刺客組織，隨後擊殺羅伯茨並在「觀測台」密室內刺殺托勒斯。為免聖殿騎士獲悉「觀測台」位置，刺客組織表示密室將在下任聖者出現前被封印，同時愛德華接獲來自英國的信件：其分居妻子已去世，其女兒珍妮佛·史考特（Jennifer Scott）被安排前往與他會面。在把大伊納瓜島基地交予刺客組織後，愛德華與女兒乘坐寒鴉號返回倫敦定居並脫離海盜生涯。多年後，愛德華再婚並育有一子——海爾森·肯威（Haytham Kenway）。
鄧肯·沃爾波（Duncan Walpole）
刺客組織的背叛者。
1715年，企圖將加勒比海的刺客組織所在以及觀測所之處洩密給哈瓦那的聖殿騎士勞雷亞諾·托勒斯，然而在前往哈瓦那的途中遭遇船難，漂流到海島上時被同樣漂流至島上的海盜愛德華﹒肯威殺死。
阿德瓦勒（Adéwalé）
1692年-1758年《刺客教條：自由的吶喊》的主角。原本是名奴隸，渴望自由的他在海盜來襲時加入了對方。
阿德瓦勒在某次航行時被西班牙海軍抓住，並準備將其運往西班牙的途中遇見了同樣被捕的海盜愛德華·肯威，兩人於是聯手逃走，阿德瓦勒之後就成了愛德華的副手。
在愛德華極力追求財富、並在發現觀測所且打算將其賣給出價最高者的時候，對其失望的阿德瓦勒與寒鴉號的船員們一度放棄了愛德華，這期間阿德瓦勒接受了刺客組織的信念成了一名刺客。
阿德瓦勒後來將寒鴉號還給已經領悟了自己的過錯並決心悔改的愛德華，但表示自己已不想再擔任其副手而離開。
之後阿德瓦勒駕駛自己的船在海上打擊聖殿騎士的船隻，並在某次劫掠時發現了聖殿騎士的包裹，而輾轉捲入了馬龍人意圖脫離法國統治的抗爭之中，阿德瓦勒在其中與馬龍人合作解放黑奴，最後刺殺了總督德法葉。
1758年時，年阿德瓦勒遇見了愛德華的兒子——海爾森，並斥責對方讓愛德華蒙羞，兩人交手時阿德瓦勒遭到謝伊的刺殺而死。
阿基里斯·達文波特（Achilles Davenport）1710年-1781年
美洲刺客兄弟會的導師。康納的導師。
阿·塔拜（Ah Tabai）
加勒比海刺客兄弟會的導師。最初對愛德華穿上鄧肯的刺客衣物感到不屑，直到愛德華成功證明自己之後認同了其加入刺客的資格。
艾芙琳·德·格朗普雷（Aveline de Grandpré）
《刺客教條III：自由使命》的主角。
Abstergo的Animus計畫1號實驗體的祖先之一。
連恩·歐布萊恩（Liam O'Brien）
刺客兄弟會的成員之一，謝伊的好友，也是引導他加入刺客兄弟會的人。
拉維倫德萊授爵騎士
本名路易斯·約瑟夫·戈捷（Louis-Joseph Gaultier de La Vérendrye），刺客兄弟會的成員之一，謝伊與連恩的前輩。
聖殿騎士團
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勞雷亞諾·德·托雷斯 - 阿亞拉
歷史人物。古巴總督、聖殿騎士團加勒比分冊的大團長。
托雷斯打算尋找觀測所，並利用複雜的先行者科技來監視，訛詐以及要挾各國的政要和位高權重的人，進一步影響他們的政府。
托雷斯最終自己找到了觀測所，並進入了核心地帶。然而，他很快被肯威追上，後者設法穿過了滿佈機關的房間將大團長刺殺。
海爾森·E·肯威（Haytham E. Kenway） （1725年12月4日 - 1781年9月16日）
詳見「海爾森·E·肯威」條目。
謝伊·派崔克·寇馬可（Shay Patrick Cormac）
《刺客信条：叛变》的主角。
21歲的謝伊在兒時好友里安·奧布萊恩（Liam O'Brien）介紹下加入北美刺客兄弟會，在里安、女刺客霍普·詹森、原住民刺客肯瑟苟沃斯的指導下進行訓練，並於一次兼具訓練性質的任務中奪得小型風帆戰船「摩莉甘」（Morrigan），但其不服從的性格使他與各人相處並不十分融洽。刺客阿德瓦萊（Adéwalé）與阿基里斯會面，帶來消息：太子港在搜尋人類以前「第一文明」（First Civilization）密室之行動中因引起地震而被摧毀，謝伊其後被派遣前往調查與該密室相關之一件第一文明遺物和一部手卷。
發明家本傑明·富蘭克林（Benjamin Franklin）以電力啟動遺物並發現遺物顯出全世界各地其他密室之位置，謝伊報告後奉命前往位於葡萄牙里斯本之密室取得室內之第一文明遺物「伊甸碎片」（Piece of Eden），但此時謝伊已因刺客組織拒絕與宿敵聖殿騎士團展開對話，以及命他不久前刺殺一名病危垂死之聖殿騎士而對組織理念產生了疑問。里斯本密室碎片被謝伊接觸後粉碎並引發地震，導致城市被毀和大量平民喪生。深感憤怒之謝伊與阿基里斯對質並推斷太子港也因相同原因被毀，有感自己所言不獲相信和刺客組織為求得伊甸碎片不惜犧牲無辜者，謝伊決定偷取手卷叛離組織但在刺客圍捕下中槍受傷墜海。
謝伊被紐約一對平民夫婦救下並獲贈一套聖殿騎士袍子，因決心報答該夫婦恩惠而參與打擊市內犯罪勢力，其行動吸引了一名聖殿騎士上校的注意，表示謝伊能改善眾人的生活。在救下另一名聖殿騎士後，謝伊獲協助從刺客手上奪回摩莉甘，繼以決定為新盟友提供協助。謝伊其後驚悉阿基里斯仍不放棄尋找密室而認為刺客組織對世界構成威脅，遂決定投誠聖殿騎士團成為刺客獵人（Assassin Hunter）對刺客同伴展開復仇，殺害了包括阿德瓦萊在內的一眾昔日刺客夥伴，女刺客霍普·詹森、原住民刺客肯瑟苟沃斯；謝伊最終接受美洲聖殿騎士團大團長海爾森·肯威（Haytham Kenway）之邀請正式成為聖殿騎士。
在美洲刺客勢力只餘下阿基里斯和里安兩人後，謝伊與海爾森追殺二人至北極圈：另一第一文明密室之所在地。阿基里斯於密室中終明瞭它們的作用與謝伊所言相同，用以穩定世界而非作為控制世界之武器，但在阻止里安攻擊謝伊時導致室內伊甸碎片被毀而引發地震。四人逃走時里安與謝伊進行決鬥但傷重戰死；阿基里斯被海爾森擊敗但在即將被殺時因謝伊加以阻止並認為聖殿騎士團應有憐憫之心以免於一死，但海爾森向阿基里斯右腿開槍，要求他永遠記得這件事以及不能重建刺客組職。
謝伊之後奉海爾森的命令，去世界各地尋找被刺客組織帶走的先行者之盒的下落。
1776年12月，謝伊前往法國凡爾賽宮刺殺了查爾斯·多里安，並奪走了先行者之盒。
喬治·門羅
英國陸軍上校、聖殿騎士團殖民地分冊的成員之一，引導了謝伊最終選擇加入聖殿騎士團的恩人。
門羅與其屬下偶然間發現了因為偷走伏尼契手卷而遭刺客兄弟會追殺而重傷落海的謝伊，門羅未因為對方是一名刺客而選擇袖手旁觀並救了對方。
謝伊康復後，門羅與其合作共同打擊在兄弟會支持下胡作非為的黑幫份子，並向他解釋聖殿騎士的理念最終也是為了拯救人民。門羅同時也善盡職責，盡其全力的守護殖民地的人民，其言行合一的舉動觸動了對刺客兄弟會早有疑慮的謝伊。
門羅在率領英軍對抗法軍的過程中戰敗，投降後與屬下一起遭到刺客組織的襲擊，謝伊及時趕到救出了門羅與其手下，並打傷了過去的同僚肯瑟苟沃斯。
在駐守阿伯尼的期間，法軍與美洲原住民聯手攻來，門羅在率軍抵擋侵攻時將得自謝伊那的伏尼契手卷還給對方保管，並分頭與他共抗敵軍來襲，但門羅之後遭到連恩的刺殺，於臨終前，門羅將自己的聖殿騎士團戒指交付給謝伊後死去。
其他人物
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卡尼耶蒂依翁（Kaniehtí꞉io）
卡尼耶蒂依翁是拉頓哈給頓的母親、海爾森的情人。美國原住民莫霍克族族母的女兒，戴斯蒙的祖先之一。
在年輕時與其他部落成員一起被抓，要被賣為奴隸前被海爾森救出，海爾森認為可以透過她與莫霍克族達成合作，完成他找尋大神殿的使命，於是在海爾森積極的合作下，最終獲取了卡尼耶蒂依翁的信任，並得到前者帶領他前往大神殿所在之處，只是缺少關鍵道具的海爾森最終未能打開大神殿，失望之餘的海爾森被卡尼耶蒂依翁給安慰，雙方很快就成了一對情人。
在發覺自己懷孕後，卡尼耶蒂依翁了解海爾森重視聖殿騎士的理想遠大於愛情，於是主動向他提出分手，之後她獨力生下兒子，並努力扶養他長大。
在七年戰爭期間，在喬治·華盛頓的命令下，卡尼耶蒂依翁所在的村莊遭到軍隊襲擊，卡尼耶蒂依翁因為無法從倒塌的樑柱下逃生，最後喪生於大火之中。
乔治·华盛顿（George Washington）
歷史人物。
爱德华·蒂奇（Edward Thatch）
歷史人物，海盜，被稱為「黑胡子（Blackbeard）」。
班傑明·富蘭克林（Benjamin Frankin）
歷史人物。
法國大革命 (1789～1799年)
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《刺客教條：大革命》的故事背景，此版本強化了用用劍格鬥的模式，並且能讓玩家一覽奢華凡爾賽時代的巴黎。
刺客兄弟會
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亞諾·維克特·多里安（Arno Victor Dorian）
《刺客教條：大革命》的主角，活躍於18世紀法國大革命時期的法國與奧地利混血刺客。
1776年12月27日：八歲之亞諾跟隨刺客父親查爾斯·多里安（Charles Dorian）前往凡爾賽宮，在等待父親回來時初遇法國聖殿騎士團大團長弗朗索瓦·德拉瑟爾（François de la Serre）的獨生女艾莉絲·德拉瑟爾（Élise de la Serre）。二人玩耍期間查爾斯被聖殿騎士謝伊·派崔克·寇馬可（Shay Patrick Cormac）刺殺[3]，弗朗索瓦基於對查爾斯的敬重而把亞諾收為義子加以養育。
1789年：常惹上麻煩的亞諾與艾莉絲成為戀人。5月5日，德拉瑟爾前往凡爾賽宮出席為艾莉絲舉行的宴會，一名送信人未能把一重要信件及時交给德拉瑟爾，亞諾請纓送信並但因被仇家襲擊而逃回德拉瑟爾宅第，把信件塞進德拉瑟爾辦公室地板後潛進皇宮與艾莉絲會面，離開時目擊德拉瑟爾被二人殺害並被誣陷為凶手，隨即被捕帶至巴士底監獄。亞諾於獄中認識了父親的摯友兼刺客大師皮爾·貝雷克（Pierre Bellec）從而了解父親真正身份，二人於兩個月後之攻佔巴士底獄事件中逃出監獄。及後亞諾找到了艾莉絲但被要求離開，兩人關係破裂；艾莉絲指出該信件本可警告德拉瑟爾聖殿騎士團內有人密謀把他殺害但最終沒有被收到。深感內疚的亞諾遂投靠刺客組織，為贖罪宣誓成為刺客。
1791年：亞諾分別刺殺了殺害德拉瑟爾的兩名兇手，其間認識了薩德侯爵（Marquis de Sade）及救出被新任聖殿騎士團大團長劫持的銀匠弗朗索瓦·湯馬斯·傑曼（François Thomas Germain）。在刺殺了大團長後發現他是對德拉瑟爾發出信件以作警告之人；傑曼則是下達殺害命令的人。為保護艾莉絲而把她帶至刺客組織基地請求協助，有意與聖殿騎士團求和的刺客組織首領奥诺雷·米拉波（Honoré Mirabeau）認為提供協助將在未來使聖殿騎士團欠下巨大人情，但深信雙方無法共存之貝雷克認為此乃通敵行為而下毒殺害了米拉波，亞諾拒絕與他聯手後和他進行戰鬥並把他殺死。
1792年8月10日：巴黎公社（Commune de Paris）攻佔杜樂麗宮，亞諾奉命潛進杜樂麗宫銷毀米拉波與路易十六（Louis XVI）之間之密件，於國王房間首遇在搜索第一文明遺物「伊甸碎片」（Piece of Eden）的拿破崙·波拿巴（Napoleon Bonaparte）。同時傑曼欲引發對國王的革命，因此指派了部下分別策動九月大屠殺、扣押糧食以營造法國貴族無視平民困境的景象、以及投票支持處決路易十六，亞諾與艾莉絲分別行動並刺殺了相關人士。
1793年1月21日：路易十六在協和廣場被公開處決，亞諾為拯救被傑曼手下包圍的艾莉絲而錯失殺害傑曼的機會，刺客組織獲悉此事後認為亞諾多次違抗命令擅自行動而把他驅逐。陷入低谷的亞諾回到德拉瑟爾宅第買醉數月，被艾莉絲告知巴黎於雅各賓專政中四分五裂才重新振作，於同年6月回到巴黎刺殺另一名聖殿騎士並得知雅各賓派首領馬克西米連·羅伯斯庇爾（Maximilien de Robespierre）仍受傑曼之命拖延革命。
1794年6月：亞諾與艾莉絲於戰神廣場（Champ-de-Mars）設計使羅伯斯庇爾名譽受損，並趕及在後者被國民公會拘捕前使他供出傑曼所在地。二人翌日前往聖殿塔刺殺傑曼，取得「伊甸之劍」的傑曼在地下密室與二人展開戰鬥，艾莉絲單獨與傑曼交鋒期間寶劍力量被激發引起爆炸，導致艾莉絲被殺而傑曼受重創，亞諾隨即將之刺殺並把艾莉絲屍首帶走葬在德拉瑟爾家族墓園。
1794年8月3日：亞諾於一所酒館會見薩德侯爵，希望能離開法國前往埃及，作為交換條件而被要求取得藏在路易九世陵墓內、原屬馬奎斯·孔多塞的手稿。亞諾潛進陵墓所在地圣但尼圣殿，同時發現一群由費林·羅斯上尉[註 2]率領之盜墓者正在尋找神殿大門。亞諾在進一步探索後發現手稿被一名為萊昂[註 3]的男孩偷去；盜墓者背後由拿破崙贊助，目的是尋找第一文明的密室並取得遺物。亞諾從盜墓者手中救出萊昂並取得手稿，受其拯救法國之決心打動而決定在離開前阻止拿破崙和盜墓者取得遺物。亞諾及後偷取了拿破崙的鑰匙繼而打開神殿大門，刺殺了費林·羅斯並取得遺物聖但尼的頭[註 4]，擊退大批盜墓者後離開神殿。事後拿破崙因叛國和擅離職守罪名而被捕；亞諾把手稿交予薩德候爵後默言離開，也發現聖但尼的頭內藏第一文明遺物伊甸碎片[註 5]，最後把它交予刺客送往開羅刺客組織之導師。
1808年：管有伊甸之劍並晉升為刺客大師的的亞諾與成為法國皇帝的拿破崙回到聖殿塔地下密室，把傑曼的遺骸藏在巴黎地下墓穴中。
聖殿騎士團
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艾莉絲·德拉瑟爾（Élise de la Serre）
《刺客教條：大革命》的女主角，聖殿騎士團成員、亞諾的青梅竹馬與戀人。由演員凱瑟琳·貝魯貝（法语：Catherine Bérubé）扮演。
在亞諾的父親查爾斯於凡爾賽宮內遇害後，艾莉絲的父親弗朗索瓦基於對查爾斯的敬重而把亞諾收為義子加以養育，本來弗朗索瓦想要將亞諾培養成一位聖殿騎士，但在艾莉絲的反對下作罷。
在艾莉絲的母親仍在世的期間，艾莉絲與亞諾逐漸有了深厚的感情，直到艾莉絲的母親過世、弗朗索瓦將其送到他鄉的女子學校就讀為止。
艾莉絲在年幼時就為了接任父親身為聖殿騎士團法國分冊大團長一職而接受過訓練，在她成年後於在外留學多年回到巴黎與亞諾重逢後，卻碰上父親被刺殺的意外，一度以為亞諾才是殺害父親的犯人讓艾莉絲十分悲痛。
法國大革命爆發後，艾莉絲率人前往巴士底監獄準備救出亞諾，卻看見了亞諾與貝雷克以信仰之躍逃出巴士底監獄的一幕，後來亞諾在德拉瑟爾宅邸找到艾莉絲並解釋自己不是殺害養父的真凶時，艾莉絲拿出了當時亞諾胡亂塞到弗朗索瓦書房的警告信要他離開。
此時弗朗索瓦·湯馬斯·傑曼已暗中掌握住聖殿騎士團的大權，艾莉絲被孤立，為了尋求盟友拉法葉的幫助時被傑曼設下的陷阱所圍，成為刺客的亞諾此時正好趕上，並救出了艾莉絲。
艾莉絲在亞諾的幫助下向刺客兄弟會提出合作，好共同對抗聖殿騎士團中的叛徒。亞諾與艾莉絲開始聯手交換情報並殺死投奔傑曼一方的聖殿騎士團成員，1793年1月21日，路易十六世將被處刑之際，亞諾與艾莉絲得知傑曼會出現在當地，並決心刺殺傑曼，但在艾莉絲陷入危機之時，亞諾最終選擇援救艾莉絲放棄刺殺傑曼，這使得艾莉絲十分憤怒，並與亞諾斷絕關係。
一年後艾莉絲找上被逐出兄弟會的亞諾，兩人再次合作，繼續剷除傑曼的盟友，最終在審訊羅伯斯比爾時知道傑曼就藏身在聖殿塔，在決定前往該處刺殺傑曼前，艾莉絲留下了兩封信件。
在聖殿塔與傑曼交手的過程中，亞諾被落石所困，艾莉絲則被復仇的怒火控制，不顧亞諾的反對獨自去和傑曼交手，卻被伊甸之劍的力量產生的爆炸重創身亡。
印度錫克帝國（1799～1849年）
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《刺客信條：編年史》印度篇的故事背景，講述印度人反抗英國殖民統治。
英國維多利亞時代（1837～1901年）
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《刺客教條：梟雄》的故事背景，以當時大英帝國的中心倫敦市作為開放世界，加入“黑道幫派”元素，處處充滿蒸汽龐克風格。
刺客兄弟會
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雅各·弗萊（Jacob Frye）
《刺客教條：梟雄》的主角之一。活躍於工業革命晚期英國孿生刺客之一，伊薇·弗萊的双胞胎弟弟。[4]
英國刺客兄弟會旗下的黑幫組織「黑鴉幫（Rooks）」的創立者兼領導者之一。
1868年，英國刺客兄弟會已近滅絕，首都倫敦被聖殿騎士團旗下的黑幫組織「暴徒幫（Blighters）」全面控制。雅各於克勞利刺殺了聖殿騎士團工業家盧波特·費里斯後和姊姊一起前往倫敦，在印籍刺客亨利·葛林安排下按各自的方式解放城市：雅各欲成立幫派「黑鴉幫（Rooks）」對抗暴徒幫和刺殺各騎士團要員；姊姊伊薇則欲找尋先父追尋的伊甸碎片。
雅各先後刺殺醫生約翰·艾略森（英语：John Elliotson）、交通公司總裁珀爾·愛德威、銀行家菲利普·兩便士、英國陸軍軍官詹姆士·布魯內爾（英语：James Brudenell, 7th Earl of Cardigan）、以及暴徒幫首領麥斯威爾·羅斯；同時姊姊伊薇於追查伊甸碎片「伊甸聖裹布（Shrouds of Eden）」的過程中除刺殺了聖殿騎士團要員露西·梭恩亦糾正了雅各在其刺殺行動中無意造成的社會問題。
和姊姊伊薇因不滿各自行動後造成的結果而爭吵，在接獲亨利報告聖殿騎士團大團長克羅佛特·史塔瑞將前往皇宮奪取聖裹布後決定作最後一次合作並一同潛進皇宮，但史塔瑞搶先到達密室取得聖裹布並因而擁有迅速治癒傷口的能力，和姊姊伊薇合力擊殺史塔瑞後把聖裹布留在密室內並決定往後繼續合作，事後獲維多利亞女王封爵。
伊薇·弗萊（Evie Frye）
《刺客教條：梟雄》的主角之一。活躍於工業革命晚期英國孿生刺客之一，雅各·弗萊的双胞胎姐姐。[4]
英國刺客兄弟會旗下的黑幫組織「黑鴉幫（Rooks）」的領導者之一。
1868年，英國刺客兄弟會已近滅絕，首都倫敦被聖殿騎士團旗下的黑幫組織「暴徒幫（Blighters）」全面控制。伊薇於克勞利刺殺了聖殿騎士團的科學家大衛·布魯斯特後和弟弟一起前往倫敦，在印籍刺客亨利·葛林安排下按各自的方式解放城市：弟弟雅各欲成立幫派「黑鴉幫（Rooks）」對抗暴徒幫和刺殺各騎士團要員；伊薇則欲找尋先父追尋的伊甸碎片。
弟弟雅各先後刺殺醫生約翰·艾略森（英语：John Elliotson）、交通公司總裁珀爾·愛德威、銀行家菲利普·兩便士、英國陸軍軍官詹姆士·布魯內爾（英语：James Brudenell, 7th Earl of Cardigan）、以及暴徒幫首領麥斯威爾·羅斯；同時伊薇從騎士團奪回的文件發現該伊甸碎片乃賦予持有者復原能力之「伊甸聖裹布（Shrouds of Eden）」，被藏於白金漢宮地下一密室中，追查過程中除刺殺了聖殿騎士團要員露西·梭恩亦糾正了弟弟雅各在其刺殺行動中無意造成的社會問題。
和弟弟雅各因不滿各自行動後造成的結果而爭吵，在接獲亨利報告聖殿騎士團大團長克羅佛特·史塔瑞將前往皇宮奪取聖裹布後決定作最後一次合作並一同潛進皇宮，但史塔瑞搶先到達密室取得聖裹布並因而擁有迅速治癒傷口的能力，和弟弟合力擊殺史塔瑞後把聖裹布留在密室內並決定往後繼續合作，事後獲維多利亞女王封爵。
亨利·葛林（Henry Green）
《刺客教條 編年史：印度篇》的主角阿爾巴茲·米爾的兒子，本名賈亞迪·米爾，亨利·葛林是他為了在倫敦行動而使用的化名。英國倫敦地區的刺客兄弟會領導者。
雖是刺客卻不擅長戰鬥，但收集情報很有一套。自知無力對抗盤踞在倫敦的聖殿騎士，一直寫信要求兄弟會派人援助卻無下文，直到伊薇、雅各姊弟的到來才慢慢扭轉了不利的情勢。
聖殿騎士團大團長史塔瑞被擊敗後，與伊薇姊弟被女王共同封為嘉德騎士，事後與伊薇結婚，並一起回到印度定居。
開膛手傑克（Jack the Ripper）
歷史上真實出現過的連環殺手。在本作的設定中為刺客兄弟會的一員、雅各的弟子之一。
聖殿騎士團
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盧波特·費里斯（Rupert Ferris）
企業家，最後被雅各刺殺。
露西·梭恩（Lucy Thorne）
神秘學家，最後被伊薇刺殺。
大衛·布魯斯特（David Brewster）
歷史人物，科學家，負責研究伊甸碎片，最後被伊薇刺殺。
其他人物
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查爾斯·羅伯特·達爾文（Charles Robert Darwin）
歷史人物。
查尔斯·狄更斯（Charles Dickens）
歷史人物。
卡尔·马克思（Karl Marx）
歷史人物。
俄罗斯十月革命（1917年）
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《刺客信條：編年史》俄羅斯篇的故事背景，發生在第一次世界大戰的倒數第二年，沙皇統治下的俄羅斯帝國土崩瓦解，主角刺客為了新生的共產主義蘇聯而進行刺殺。本篇是所有刺客信條系列中，時間最貼近現代的故事。